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        掃描電子顯微鏡(SEM)之化學方法制備樣品

        日期:2021-03-26

        掃描電子顯微鏡(SEM)之化學方法制備樣品,下面澤攸科技小編為大家介紹一下如何使用化學方法制備樣品。
         
          化學方法制備樣品的程序通常是:清洗、化學固定、干燥、噴鍍金屬。
         
          1、清洗:某些生物材料表面常附血液、細胞碎片、消化道內的食物殘渣、細菌、淋巴液及粘液等異物,掩蓋著要觀察的部位,因而,需要在固定之前用生理鹽水或等滲緩沖液等把附著物清洗干凈。亦可用5%碳酸鈉沖洗或酶消化法去除這些異物。
         
          2、固定:通常采用醛類(主要是戊二醛和多聚甲醛)與四氧化鋨雙固定,也可用四氧化鋨單固定。四氧化鋨固定不僅可良好地保存組織細胞結構,而且能增加材料的導電性和二次電子產額,提高掃描電子顯微圖象的質量。這對高分辨掃描電子顯微術是重要的。為增強這種效果,可用四氧化鋨-單寧酸或是四氧化鋨-珠叉二胼等反復處理材料,使其結合更多的重金屬鋨,這就是導電染色。
         
          3、干燥:固定后通常采用臨界點干燥法。其原理是:適當選擇溫度和壓力,使液體達到臨界狀態(液態和氣相間界面消失),從而避免在干燥過程中由水的表面張力所造成的樣品變形。對含水生物材料直接進行臨界點干燥時,水的臨界溫度和壓力不能過高(37.4℃,218帕)。通常用乙醇或丙酮等使材料脫水,再用一種中間介質,如醋酸戊酯,置換脫水劑,然后在臨界點干燥器中用液體或固體二氧化碳、氟利昂13以及一氧化二氮等置換劑置換中間介質,進行臨界干燥。
         
          4、噴鍍金屬:將干燥的樣品用導電性好的粘合劑或其他粘合劑粘在金屬樣品臺上,然后放在真空蒸發器中噴鍍一層50~300埃厚的金屬膜,以提高樣品的導電性和二次電子產額,改善圖象質量,并且防止樣品受熱和輻射損傷。如果采用離子濺射鍍膜機噴鍍金屬,可獲得均勻的細顆粒薄金屬鍍層,提高掃描電子圖象的質量。

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        作者:小攸


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